医療関係資格試験マニア

• 遺伝子解析技術：まとめ ( 2018/12/22 )
• 遺伝子解析技術３：111歯B27 ( 2018/04/15 )
• PCR法の原理 ( 2018/01/05 )
• 歯科国試：予想英語問題９ 遺伝子解析技術 ( 2017/03/29 )
• 遺伝子解析技術　２　107A33 ( 2016/11/13 )
• 遺伝子解析技術 (NBDE Part 1) ( 2016/10/31 )
• 生化学の５問（ロムニーから） ( 2016/10/30 )

遺伝子解析技術の問題は、111回歯科国試でも出ました。
112回については、なんとも言えませんが、
頻出分野であることは確か。

どんな形式で出るか？
図が出て、解析途中の物質を当てるものか。
どうでしょうか？

この領域の範疇に入る記事をpick upしました。

 
https://www.thermofisher.com/jp/ja/home.html　の一部から

遺伝子解析技術 (NBDE Part 1)

遺伝子解析技術　２　107A33

遺伝子解析技術３：111歯B27

PCR法の原理

歯科国試：予想英語問題９ 遺伝子解析技術

生化学の５問（ロムニーから）

もう一度、
blottingの復習！　：　MOREへ

107A33 でも似たような問題が既出。

でも、ひっかりそうな問題ですな。
しっかり理解していないと間違えそう。

 
http://www.koreaittimes.com/news/articleView.html?idxno=14431　から



111B27
遺伝子検査はどれか。３つ選べ。

a　サザンブロット法
b　ウエスタンブロット法
c　ガスクロマトグラフィー検査
d　in situ ハイブリダイゼション法
e　PCR法


解答：MOREへ

 歯科医師国家試験　臨床問題を熱く語るブログ　から


基本的な事項の質問をしてみる　その１－４
111回国試で出そうなところ～その１－4
から項目別に編集改編

PCR法の原理を説明しろ！

ヒトゲノムの場合、約30億塩基対もの長さとなるDNAで構成されていると言われている。
この中から自分のほしい塩基配列だけを取り出して、増幅させたいとする。
このとき必要な操作がPCR法である。

 PCR(Polymerase Chain Reaction)法ではDNAのある一部分だけを選択的に増幅させることができる。
これには、DNAポリメラーゼによる酵素反応を利用する。
なお、実際にPCRを行う場合、試薬を混ぜて機械にセットしてスイッチを押すだけであるため、誰にでも可能である。

 

DNAの増幅

①DNAを増幅させるため、まず最初にしないといけないのはDNAの二本鎖を一本鎖にすることである。
　DNAを入れた反応液を約94℃にし、熱変性させる。
　これにより、二本鎖DNAが一本鎖DNAに変性する。

 

　

 

②一本鎖DNAにDNAポリメラーゼを作用させるためには、予めプライマーをDNAに結合させる必要がある。
　このように、プライマーがDNAと結合することをアニーリングという。
　アニーリングは約55～60℃で行うが、プライマーによって温度が異なってくる。

 

　

 

③最後にDNAポリメラーゼを反応させ、DNAを伸長させる。
　耐熱性DNAポリメラーゼ(Taq polymerase)で行う場合、約72℃で行う。

 

　

 

④、①～③を繰り返してDNAを増幅させる。

 

・Tm(melting temperature)
プライマーの設計にはTm値の計算が不可欠である。
Tm値とは二本鎖DNAの50％が一本鎖DNAに分かれるときの温度である。

 そして、このTm値をもとにしてアニーリングするときの温度を決めるのである。

PCR産物の生成
PCR法では1サイクル目で2分子、2サイクル目で4分子、3サイクル目で8分子のDNA断片ができる。

 

 

　

 

このとき、3サイクル目で初めて目的の長さのPCR産物を生成することができる。
後は、PCRの工程を続ければ続けるほど目的のPCR産物を得ることができる。

 

https://kusuri-jouhou.com/creature2/pcr.html　から転用改編



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PCR（polymerase chain reaction）
DNAを増幅するための原理またはそれを用いた手法

Western blot
電気泳動によって分離したタンパク質を膜に転写し、
任意のタンパク質に対する抗体でそのタンパク質の存在を検出する手法

Sothern blot
Edwin Southern が考案した、DNAを同定するための手法である。

Northern blotting
分子生物学研究において用いられる、RNAを検出する手法

Southwestern blot
プローブにDNA断片やオリゴヌクレオチドを用い、
塩基配列特異的にDNAに結合するタンパク質（主に転写調節因子）を検出する手法

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関係記事：

遺伝子解析技術 (NBDE Part 1)

生化学：歯科 練習問題

歯科国試：予想英語問題９ 遺伝子解析技術

遺伝子解析技術 (NBDE Part 1)

を改題


The (　　　　　　) is a technique used in molecular biology research
to study gene expression by detection of RNA (or isolated mRNA) in a sample.

(　　　　　 ) に入るのははどれか？１つ選べ。

A PCR
B Western blot
C Nothern blot
D Sothern blot
E Southwestern blot


類題：

遺伝子解析技術　２　107A33

生化学の５問（ロムニーから）

問２



解答：MOREへ

歯科国試で出た遺伝子解析技術の問題


参考記事：

遺伝子解析技術 (NBDE Part 1)

107A33
検体検査法と目的との組合せで正しいのはどれか。 1 つ選べ。

ａ 比色法 ――――――――――――――――溶液体積の測定
ｂ ノーザンブロット法 ――――――――――― 抗原タンパク質の定量
ｃ ウエスタンブロット法 ―――――――――― RNA の検出
ｄ in situ ハイブリダイゼーション法 ――――― アミノ酸配列の決定
ｅ Polymerase Chain Reaction〈PCR〉法 ――  DNA の増幅



解答：MOREへ

遺伝子解析技術に関する問題


1st Aid Q&A NBDE Part 1: Biochemistry and Physiologyから


 
http://www.ige3.unige.ch/services.php


Q58

Which laboratory technique detemines RNA content of a protein sample?

A PCR
B Western blot
C Nothern blot
D Sothern blot
E Southwestern blot


解答：MOREへ

生化学の５問（ロムニーから）

ロムニー配信３９号から転用改編



問１ 腎機能で正しいのはどれか。すべて選べ。

A レニンを分泌する
B 体内の恒常性を維持する
C 赤血球の成熟に関与する
D カルシウム代謝に関与する
E 活性型ビタミンD を生成する


問２ DNA の複製の過程の中で二重らせん構造をほどくのはどれか。1 つ選べ。

A リガーゼ
B ヘリカーゼ
C 岡崎フラグメント
D DNA ポリメラーゼ
E トポイソメラーゼ


問３ 心機能、肝機能の低下に共通して変化する血中酵素はどれか。2 つ選べ。

A AST
B ALT
C LDH
D ALP
E γ‐GTP


問４ 細胞膜に存在するプロテオグリカンはどれか。1 つ選べ。

A デコリン
B アグリカン
C パールカン
D シンデカン
E フィブロモデュリン


問５ 唾液よりも血漿に多く含まれているのはどれか。1 つ選べ。

A IgM
B ムチン
C ヒスタチン
D 分泌型IgA
E カリクレイン


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